專利名稱：菲律賓蛤仔選育系的制種方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于貝類養(yǎng)殖范疇，具體涉及菲律賓蛤仔的制種方法。
技術(shù)背景菲律賓蛤仔(^zo^邵es /^'h'，i'朋7Yffl7)屬雙殼綱簾蛤科、綴錦亞科、蛤仔屬，屬于廣溫、廣鹽性品種。目前在世界約200萬噸的菲律賓蛤仔產(chǎn)量中，約 90%來自于養(yǎng)殖，且主要來自我國大陸的養(yǎng)殖(Goulletquer 1997)。 1999年我 國灘涂貝類的產(chǎn)量為246.4萬噸，其中73%為菲律賓蛤仔，約占我國海水養(yǎng)殖總 產(chǎn)量的18.4%。隨著人民生活水平的提高，國內(nèi)外市場均供不應(yīng)求，市場潛力巨 大。但是由于不注重資源保護，亂采濫捕，其天然產(chǎn)量呈逐年下降趨勢。目前 苗種嚴(yán)重不足，種質(zhì)退化是制約我國北方地區(qū)蛤仔養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的"瓶頸"(閏 喜武，2005)。菲律賓蛤仔貝殼形態(tài)變化很大，殼面顏色和花紋變化各異，曾被許多分類 學(xué)家定義為不同的種(莊啟謙，2000)。長期以來，人們認(rèn)識到這種殼色多態(tài)現(xiàn) 象，但還沒有人研究這種殼色多態(tài)現(xiàn)象存在的原因。在殼色的多態(tài)方面，Taki(1941)已經(jīng)詳盡地描述過，他將殼色劃分為4種類型條帶；花紋；白化；雜色；并根據(jù)孟德爾遺傳定律，對菲律賓蛤仔殼色特征的提出了一個遺傳假設(shè)(沒 有經(jīng)過證實)；Gerard (1978)研究了菲律賓蛤仔貝殼條紋的分布，Richardson (1978， 1988)研究了條紋形成與潮汐節(jié)奏相關(guān)的問題；閆喜武等(2002-2005) 建立了菲律賓蛤仔殼色品系，成功選育出斑馬蛤、海洋紅、兩道紅等殼色品系。 張躍環(huán)等(2005-2008)在此基礎(chǔ)上，繼續(xù)對不同殼色菲律賓蛤仔的進行定向 選育，得到生長快或抗逆性強的選育系。海洋雙殼類貝殼的顏色過去僅被作為分泌產(chǎn)物而一直被忽視。事實上雙殼 類貝殼的顏色不僅與它們的生態(tài)和行為有關(guān)還與其生長、存活等表型性狀有關(guān)。 Newkirk等(1980)研究了貽貝(#j^z7"s ed/h's)殼色的可遺傳性與生長的關(guān) 系發(fā)現(xiàn)，由于殼色深淺影響對光和熱的吸收，不同殼色的貽貝在高溫季節(jié)生長 快慢不同，藍殼色個體大于棕殼色個體10%-20% 。 Fiqueroa等(1992)研究了智利牡蠣(7Yo ^res c^7e/L^s)殼色多態(tài)與生長的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，在周年的生長 中，各種殼色不同種群生長無差異性，但在高溫季節(jié)，無條帶的淺殼色個體生長 快，相反，在低溫季節(jié)，有條帶個體生長快，也就是說，不同顏色貝殼具有吸 熱和散熱的功能。Brand等(1994)以不同產(chǎn)地，不同年齡組成蝦夷扇貝 (/^z^'/20/ ecte/ yessoe/LS^s)為試驗材料，對決定殼色多態(tài)的因素進行了分析， 認(rèn)為殼色與生長有關(guān)。根據(jù)每個貝殼上的著色與否將天然種群中的蝦夷扇貝劃 分為3種類型，即p/p (兩殼均著色)、p/n (—殼著色，另一殼不著色)、n/n (兩 殼均未著色)。發(fā)現(xiàn)隨著年齡的增長，p/p、 p/n類型的比例增加，n/n類型比例 迅速減少，且n/n類型個體小、生長慢、成活率低。在我國，張國范等(2000-2005)以殼色為標(biāo)記，選育出的"中科紅海灣扇 貝"，主要特點是養(yǎng)殖群體95%以上的子代個體為桔紅殼色，成活率提高15% 20%，生長速度提高10% 15%，出肉率增加10%以上。趙洪恩等[34]在關(guān)于瑪 瑙鮑(^ah'o"s 力a/ /7ai)探索與研究中發(fā)現(xiàn)，由于基因突變產(chǎn)生的紅殼鮑(瑪瑙鮑)具有生長快，抗病力強的特點，說明殼色與生長、存活相關(guān)。 閆喜武等(2002-2005)在對菲律賓蛤仔研究中發(fā)現(xiàn)，不同殼色的菲律賓蛤仔生 長發(fā)育存在差別并且殼色這一質(zhì)量性狀可以穩(wěn)定遺傳給后代，斑馬蛤、兩道紅 蛤仔、海洋紅蛤仔的子一代100%仍為斑馬蛤、兩道紅、海洋紅，并由此培育出 一系列菲律賓蛤仔養(yǎng)殖新品種斑馬蛤、兩道紅、海洋紅等。何毛賢等(2006) 在對馬氏珠母貝(/^'/7c"A歷ai^e/ sh')的研究中，通過單體培養(yǎng)得到了一個 紅殼色品系。常亞青等(2007)根據(jù)蝦夷扇貝的殼色，選育出蝦夷扇貝象牙白 殼色品系。 發(fā)明內(nèi)容為解決菲律賓蛤仔種質(zhì)退化的問題，本發(fā)明提供一種以殼色為標(biāo)記的菲律 賓蛤仔選育系的制種方法，利用殼色這一質(zhì)量性狀為標(biāo)記，以不同殼色的菲律 賓蛤仔為材料，通過逐代的定向選育獲得具有優(yōu)良性狀的選育系。所述的逐代的定向選育的方法，是以兩道紅、兩道白、瑪瑙黑、海洋紅、 珍珠白、斑馬蛤、波紋蛤作為繁殖群體，親貝成熟后以相同殼色的親貝作為父 本、母本，在親貝性腺成熟時，通過人工刺激的方法促使親貝產(chǎn)卵、排精，經(jīng) 過產(chǎn)卵及孵化、幼蟲培養(yǎng)、稚貝培育、稚貝中間育成環(huán)節(jié)，獲得了子一代的各種殼色的蛤仔品系；待子代性腺成熟，可以產(chǎn)卵、排精時，再以相同殼色的子一代作為親貝放養(yǎng)，并以相同的方式進行定向選育，從而獲得子二代，如此循環(huán)下去使得殼色得到進一步純化；從中篩選出生長快、抗逆性強的殼色品系。 所述的菲律賓蛤仔選育系的制種方法，其特征在于親貝產(chǎn)卵、排精前，將不同殼色的親貝放在同一個生態(tài)4下池中混養(yǎng)，產(chǎn)卵時再單獨放置放養(yǎng)。所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特征在于按常規(guī)方法進行產(chǎn)卵、孵化的操作過程中采取嚴(yán)格的隔離措施，即對親本產(chǎn)卵、排精開始到孵化成D形幼蟲階段所采用的一切器具和設(shè)施進行清洗，并對親本進行清洗后再將同一殼色蛤仔親貝單獨放入同 一容器中放養(yǎng)。所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特征在于所述人工刺激的方法為陰干4h，流水刺激lh。所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特征在于在稚貝中間育成時， 定期更換不同數(shù)目的網(wǎng)袋，即60目-40目-20目。所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特征在于在幼蟲培養(yǎng)時每天投 喂的餌料為，前期投喂綠色巴夫藻，后期混合投喂質(zhì)量比l: l的綠色巴夫藻和 小球藻；所述綠色巴夫藻為湛江等鞭金藻。其制種方法的具體步驟如下-a. 親貝來源與選取從野生群體(養(yǎng)殖群體)中，選出2齡的殼型規(guī)整，殼色一致的兩道紅、兩道白、瑪瑙黑、海洋紅、珍珠白、斑馬蛤、波紋蛤作為 繁殖群體，放到生態(tài)蝦池中進行自然促熟。定期取樣觀察性腺發(fā)育，待其性腺成熟。b. 產(chǎn)卵及孵化于6月上旬和9月下旬，親貝性腺成熟，將不同殼色蛤仔親 貝單獨放置，經(jīng)過陰干4h，流水lh的刺激，放到澄有新鮮海水的100L白色塑料 桶中，大約經(jīng)過2-4h，各組幾乎全部產(chǎn)卵。為了提高孵化率，對受精卵采取分 桶孵化，孵化密度控制在30-40個/ml，并將多余的受精卵收集到水泥池中。在 溫度22-24。C的條件下，大約經(jīng)過25 h全部孵化至D形幼蟲。c. 幼蟲培養(yǎng)用300目篩絹網(wǎng)制作的網(wǎng)箱選育D形幼蟲，為了獲得大量子代， 采用白色塑料桶與水泥池培育相結(jié)合的辦法，水泥池中為各種幼蟲的混合培養(yǎng)。 幼蟲培養(yǎng)密度6-8個/ml，每2天換1次水，換水量為100%。館料每天投喂2次，前期為綠色巴夫藻(湛江等鞭金藻)，后期為綠色巴夫藻(湛江等鞭金藻)、小球 藻(1: 1)混合投喂，投餌量適幼蟲攝食情況而定。為防止白色塑料桶中不同
殼色蛤仔幼蟲之間渴雜，換水網(wǎng)箱單獨使用。幼蟲培育期間，水溫為20. 4-23. 6°C， 鹽度為24-28。為了消除養(yǎng)殖密度的影響，在幼蟲期定期對密度進行調(diào)整。
d. 稚貝培育幼蟲變態(tài)后，正常培育同c。當(dāng)稚貝生長至40日齡時，春季 稚貝裝入60目的網(wǎng)袋中，進行中間育成；秋季稚貝裝入80目的網(wǎng)袋，并保證每 種殼色蛤仔稚貝密度一致。進行室內(nèi)越冬，水溫為生態(tài)池中自然水溫；而后到 第二年的春季進行中間育成。
e. 稚貝中間育成于當(dāng)年的7-10月或次年5-10月在該場的生態(tài)池中進行中 間育成。中間育成采用60目網(wǎng)袋(40cmX60cm)，在稚貝中間育成階段，定期更 換不同目數(shù)的網(wǎng)袋(60目-40目-20目)，消除網(wǎng)目對稚貝生長的影響；同時， 對密度進行調(diào)整，使每個重復(fù)密度保持一致。水泥池中混合個體大概在3mm左右 殼色就完全表現(xiàn)出來，在更換網(wǎng)目的過程中，將各種殼色子代挑選出來，進行 中間育成。
f. 經(jīng)過幼蟲培養(yǎng)、稚貝培育、中間育成等環(huán)節(jié)，獲得了子一代的各種殼色 的蛤仔品系。9月下旬的子代性腺成熟，可以產(chǎn)卵，從而獲得子二代，如此循環(huán) 下去使得殼色得到進一步純化。從中篩選出生長快、抗逆性強的殼色品系。
本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果在于通過若干代的定向純化，篩選出生長快的 珍珠白、海洋紅、兩道紅品系；抗逆性強的斑馬蛤品系。本發(fā)明獲得的選育系 具有生長快或存活率高的特點，珍珠白〉海洋紅>兩道紅，生長速度分別提 高20%>15%>10%;斑馬蛤抗逆性最強，存活率提高120-200%。從而為菲律賓 蛤仔殼色品系間雜交及品種改良奠定了一定的基礎(chǔ)。將不同殼色的親貝放在同 一個池中混養(yǎng)，主要目的是使各種殼色的親貝性腺發(fā)育一致，達到同步產(chǎn)卵的 目的，這樣也有利于開展雜交試驗。
具體實施方式
實施例1.
a.親貝來源與選取于2003年6月，從野生群體(養(yǎng)殖群體)中，選出2齡 的處于臨產(chǎn)狀態(tài)的殼型規(guī)整，殼色一致的兩道紅、海洋紅、斑馬蛤各20個作為 繁殖群體。b. 產(chǎn)卵及孵化將不同殼色品系蛤仔親貝單獨放置，經(jīng)過陰干4h，流水lh
的剌激，放到澄有新鮮海水的100L白色塑料桶中，大約經(jīng)過2-4 h，各組幾乎全 部產(chǎn)卵。為了提高孵化率，孵化密度控制在30-40個/ml，采取分桶孵化。在溫 度22-23"的條件下，大約經(jīng)過25 h全部孵化至D形幼蟲。
c. 幼蟲培養(yǎng)用300目篩絹網(wǎng)制作的網(wǎng)箱選育D形幼蟲，分別放置白色塑料 桶中培養(yǎng)。幼蟲培養(yǎng)密度6-8個/ml，每1天換1次水，換水量為50%。餌料每天投 喂2次，前期為湛江等鞭金藻，后期為湛江等鞭金藻、小球藻(1: 1)混合投喂， 投餌量適幼蟲攝食情況而定。為防止白色塑料桶中不同殼色蛤仔幼蟲之間混雜， 換水網(wǎng)箱單獨使用。幼蟲培育期間，水溫為22.4-23.6匸，鹽度為24-28。為了消 除養(yǎng)殖密度的影響，在幼蟲期定期對密度進行調(diào)整，使每個殼色品系幼蟲的密度 保持一致。
d. 稚貝培育幼蟲變態(tài)后，正常培育同c。當(dāng)稚貝生長至40日齡時，將各 種殼色蛤仔稚貝裝入60目的網(wǎng)袋，并保證每種殼色蛤仔稚貝密度一致。
e. 稚貝中間育成于7-IO月在該場的生態(tài)池中進行中間育成，此時水溫 24-30°C，。中間育成采用60目網(wǎng)袋(40cmX60cm)，在稚貝中間育成階段，定期 更換不同目數(shù)的網(wǎng)袋(60目-40目-20目)，消除網(wǎng)目對稚貝生長的影響；同時， 對密度進行調(diào)整，使每個重復(fù)密度保持一致。
f. 經(jīng)過幼蟲培養(yǎng)、稚貝培育、中間育成等環(huán)節(jié)，獲得了子一代的各種殼色 的蛤仔品系。次年6月上旬和9月下旬子代性腺成熟，可以在春秋兩個季節(jié)產(chǎn)卵， 從而獲得子二代，如此循環(huán)下去使得殼色得到進一步純化，經(jīng)過3代的純化，殼 色純化率達100%。從2003-2005年，先后選育出F廣F3代殼色品系，發(fā)現(xiàn)兩道紅、 海洋紅品系具有生長快的特點；斑馬蛤品系具有抗逆性強的特點。
實施例2.
a. 親貝來源與選取于2005年9月，從野生群體(養(yǎng)殖群體)中，選出2齡 的處于臨產(chǎn)狀態(tài)的殼型規(guī)整，殼色一致的兩道紅、兩道白、瑪瑙黑、海洋紅、 珍珠白、斑馬蛤、波紋蛤各20個作為繁殖群體。
b. 產(chǎn)卵及孵化將不同殼色品系蛤仔親貝單獨放置，經(jīng)過陰干4h，流水lh 的刺激，放到澄有新鮮海水的100L白色塑料桶中，大約經(jīng)過2-4h，各組幾乎全 部產(chǎn)卵。為了提高孵化率，孵化密度控制在30-40個/ml，采取分桶孵化。在溫度22-23"C的條件下，大約經(jīng)過25 h全部孵化至D形幼蟲。
c. 幼蟲培養(yǎng)用300目篩絹網(wǎng)制作的網(wǎng)箱選育D形幼蟲，分別放置白色塑料 桶中培養(yǎng)。幼蟲培養(yǎng)密度6-8個/ml，每1天換1次水，換水量為50%。餌料每天投 喂2次，前期為湛江等鞭金藻，后期為湛江等鞭金藻、小球藻(1: 1)混合投喂， 投餌量適幼蟲攝食情況而定。為防止白色塑料桶中不同殼色蛤仔幼蟲之間混雜， 換水網(wǎng)箱單獨使用。幼蟲培育期間，水溫為22.4-23.6'C,鹽度為24-28。為了消 除養(yǎng)殖密度的影響，在幼蟲期定期對密度進行調(diào)整，使每個殼色品系幼蟲的密度 保持一致。
d. 稚貝培育幼蟲變態(tài)后，正常培育同c。當(dāng)稚貝生長至40日齡時，將各 種殼色蛤仔稚貝裝入80目的網(wǎng)袋，進行室內(nèi)越冬，并保證每種殼色蛤仔稚貝密
度一致。
e. 稚貝中間育成于2006年5-10月在該場的生態(tài)池中進行中間育成，此時 水溫24-3(TC，。中間育成采用60目網(wǎng)袋(40cmX60cm)，在稚貝中間育成階段， 定期更換不同目數(shù)的網(wǎng)袋(60目-40目-20目)，消除網(wǎng)目對稚貝生長的影響； 同時，對密度進行調(diào)整，使每個重復(fù)密度保持一致。
f. 經(jīng)過幼蟲培養(yǎng)、稚貝培育、中間育成等環(huán)節(jié)，獲得了子一代的各種殼色 的蛤仔品系。
2006年9月下旬，以實施例1得到的子代性腺成熟，通過實施例1的環(huán)節(jié)， 獲得子二代，如此循環(huán)下去使得殼色得到進一步純化，經(jīng)過3代的純化，殼色 純化率近乎100%。從2005-2008年，先后選育出F「F3代殼色品系，發(fā)現(xiàn)珍珠白、 海洋紅、兩道紅品系具有生長快的特點；斑馬蛤品系具有抗逆性強的特點，與 2003-2005年得到的選育系結(jié)果一致。與對照組相比，大小珍珠白〉海洋紅〉 兩道紅，生長速度分別提高20%〉15%〉10%;斑馬蛤抗逆性最強，存活率提高 120-200%。
權(quán)利要求
1、一種菲律賓蛤仔選育系的制種方法，其特征在于利用殼色這一質(zhì)量性狀為標(biāo)記，以不同殼色的菲律賓蛤仔為材料，通過逐代的定向選育獲得具有優(yōu)良性狀的選育系；所述的逐代的定向選育的方法，是以兩道紅、兩道白、瑪瑙黑、海洋紅、珍珠白、斑馬蛤、波紋蛤作為繁殖群體，親貝成熟后以相同殼色的親貝作為父本、母本，在親貝性腺成熟時，通過人工刺激的方法促使親貝產(chǎn)卵、排精，經(jīng)過產(chǎn)卵及孵化、幼蟲培養(yǎng)、稚貝培育、稚貝中間育成環(huán)節(jié)，獲得了子一代的各種殼色的蛤仔品系；待子代性腺成熟，可以產(chǎn)卵、排精時，再以相同殼色的子一代作為親貝放養(yǎng)，并以相同的方式進行定向選育，從而獲得子二代，如此循環(huán)下去使得殼色得到進一步純化；從中篩選出生長快、抗逆性強的殼色品系。
2、 如權(quán)利要求1所述的菲律賓蛤仔選育系的制種方法，其特征在于親 貝產(chǎn)卵、排精前，將不同殼色的親貝放在同一個生態(tài)蝦池中混養(yǎng)，產(chǎn)卵時再單 獨放置放養(yǎng)。
3、 如權(quán)利要求l所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特征在于按常 規(guī)方法進行產(chǎn)卵、孵化的操作過程中采取嚴(yán)格的隔離措施，即對親本產(chǎn)卵、排 精開始到孵化成D形幼蟲階段所采用的一切器具和設(shè)施進行清洗，并對親本進行 清洗后再將同 一殼色蛤仔親貝單獨放入同 一容器中放養(yǎng)。
4、 如權(quán)利要求l所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特征在于所述 人工刺激的方法為陰干4h，流水刺激lh。
5、 如權(quán)利要求l所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特征在于在稚 貝中間育成時，定期更換不同數(shù)目的網(wǎng)袋，即60目-40目-20目。
6、 如權(quán)利要求1所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特征在于在幼 蟲培養(yǎng)時每天投喂的餌料為，前期投喂綠色巴夫藻，后期混合投喂體積比1: 1 的綠色巴夫藻和小球藻；所述綠色巴夫藻可以用湛江等鞭金藻取代。
全文摘要
一種菲律賓蛤仔選育系的制種方法，利用殼色這一質(zhì)量性狀為標(biāo)記，以不同殼色的菲律賓蛤仔為材料，通過逐代的定向選育獲得具有優(yōu)良性狀的選育系。具體地說，殼色品系包括兩道紅、兩道白、瑪瑙黑、海洋紅、珍珠白、斑馬蛤、波紋蛤；通過若干代的定向純化，篩選出生長快的珍珠白、海洋紅、兩道紅品系；抗逆性強的斑馬蛤品系。本發(fā)明獲得的選育系具有生長快或存活率高的特點，從而為菲律賓蛤仔殼色品系間雜交及品種改良奠定了一定的基礎(chǔ)。
文檔編號A23K1/18GK101288387SQ20081001175
公開日2008年10月22日 申請日期2008年6月11日 優(yōu)先權(quán)日2008年6月11日
發(fā)明者澎 張, 張力群, 張國范, 張躍環(huán), 鳳 楊, 潘發(fā)林, 閆喜武 申請人:大連水產(chǎn)學(xué)院