專利名稱：紫葉酢漿草組培快繁方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)，尤其是指涉及紫葉酢漿草組培快繁方法。
背景技術(shù)：
紫葉酢漿草(Oxalis regnellii)是酢漿草科酢漿草屬多年生草本，原產(chǎn)于熱帶美洲，花為淡紫色，葉呈三角形且長年紫紅色，具有很大的觀賞價值。它的繁殖一般都采用切分塊莖的方法，但這樣的繁殖速度慢，遠遠不能滿足市場的需要。利用組培技術(shù)可以建立起一套快速簡便的工廠化繁殖方法，此方法增殖速度快、增值倍數(shù)高且又操作簡便，適用于大規(guī)模工廠化生產(chǎn)，具有很大的經(jīng)濟價值。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目在于提供一種紫葉酢漿草組培快繁方法，用組培技術(shù)建立起一套快速簡便的工廠化繁殖方法，以適用于大規(guī)模工廠化生產(chǎn)。
本發(fā)明目的通過下述方案實現(xiàn)一種紫葉酢漿草組培快繁方法，步驟依序為第一，采集外植體、消毒、建立無菌苗；第二，建立一套試管苗的快速繁殖循環(huán)體系；第三，煉苗移栽，其中，所述外植體取自紫葉酢漿草新抽出的葉片與葉柄，將葉柄切成0.5cm左右小段后接種在初代培養(yǎng)基上，把葉片切成小塊后接種到同樣培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)溫度為22-26℃，光照時間12-14小時/天，光照強度為2000-3000Lux的條件下培養(yǎng)28-30天后就分化出無菌的再生植株；所述試管苗的快速繁殖循環(huán)體系以葉柄為起始材料，誘導(dǎo)分化出小芽，再進行芽增殖培養(yǎng)，最后從芽團上切下一部分芽的葉柄作為繁殖起始材料，余下的芽團切分成單株后進行生根培養(yǎng)。
本發(fā)明的優(yōu)越性在于用組培技術(shù)建立起了一套快速簡便的工廠化繁殖方法，具有繁殖、增殖快，比例可達每45天增殖45-60倍，生根率高，可達100％。適用于大規(guī)模工廠化生產(chǎn)。
具體實施例方式
1，外植體消毒和無菌苗的建立取紫葉酢漿草新抽出的葉片與葉柄，用洗潔精清洗后用流水沖洗干凈，用75％酒精浸洗3-5秒，無菌水沖洗2-3遍，再用0.1％HgCl2溶液浸泡3min，無菌水沖洗4-6次。將葉柄切成0.5cm左右小段后接種在初代培養(yǎng)基上，初代培養(yǎng)基為Ms+NAA0.5-0.7mg/L上，把葉片切成小塊后接種到同樣培養(yǎng)基上。拓培養(yǎng)溫度為22-26℃，光照時間12-14h/d，光照強度為2000-3000Lux的條件下培養(yǎng)28-30天后就分化出無菌的再生植株。
2 試管苗的快速增值紫葉酢漿草的增殖是以葉柄為起始材料，誘導(dǎo)分化出小芽，再進行芽增殖培養(yǎng)，最后從芽團上切下一部分芽的葉柄作為繁殖起始材料，余下的芽團切分成單株后進行生根培養(yǎng)，增殖比例可達每45天增殖45-60倍，這樣就建立了一完整的快速繁殖循環(huán)體系。
(1)葉柄誘導(dǎo)分化從芽團上切下高5cm以上的葉柄并切分為長0.5cm左右小段，接到誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基Ms+NAA0.5-0.7mg/L上培養(yǎng)28天，分化出的芽高1cm左右，分化率達93.3％。培養(yǎng)條件為溫度22-26℃，光照時間12-14h/d，光照強度為2000-3000Lux。
(2)芽增殖培養(yǎng)把剛分化出的芽轉(zhuǎn)移到芽增殖培養(yǎng)基Ms+6-BA0.4-0.6mg/L上，培養(yǎng)12-15天，可獲得均勻一致的苗高達5cm左右，芽個數(shù)增殖3-5倍。培養(yǎng)條件同上。每個芽團上切下2-3根葉柄，約15-20小段，進行繼續(xù)繁殖。
(3)生根培養(yǎng)余下的芽團按鱗球切分為單株接到生根培養(yǎng)基Ms+NAA0-0.05mg/L上進行生根培養(yǎng)，切分比例為1∶3-5，培養(yǎng)7-9天后開始生根，生根率達100％，21天后根系發(fā)達，鱗球變大，芽也變粗壯，苗高達6-8cm。
3 煉苗移栽當苗在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)21天后，將瓶口打開，煉苗3-5天后移栽到帶營養(yǎng)土容器中，營養(yǎng)土成分為農(nóng)田土∶泥碳土∶砂子＝4∶3∶3。移栽初期，即前7天，保持環(huán)境溫度在15-30℃，濕度50％以上，移栽的成活率達100％。
權(quán)利要求
1.一種紫葉酢漿草組培快繁方法，步驟依序為第一，采集外植體、消毒、建立無菌苗；第二，建立一套試管苗的快速繁殖循環(huán)體系；第三，煉苗移栽，其中，所述外植體取自紫葉酢漿草新抽出的葉片與葉柄，將葉柄切成0.5cm左右小段后接種在初代培養(yǎng)基上，把葉片切成小塊后接種到同樣培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)溫度為22-26℃，光照時間12-14小時/天，光照強度為2000-3000Lux的條件下培養(yǎng)28-30天后就分化出無菌的再生植株；所述試管苗的快速繁殖循環(huán)體系以葉柄為起始材料，誘導(dǎo)分化出小芽，再進行芽增殖培養(yǎng)，最后從芽團上切下一部分芽的葉柄作為繁殖起始材料，余下的芽團切分成單株后進行生根培養(yǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特征在于所述初代培養(yǎng)基為Ms+NAA0.5-0.7mg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特征在于所述對外植體的消毒用洗潔精清洗后用流水沖洗干凈，用75％酒精浸洗3-5秒，無菌水沖洗2-3遍，再用0.1％HgCl2溶液浸泡3min，無菌水沖洗4-6次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特征在于所述葉柄誘導(dǎo)分化是從芽團上切下高5cm以上的葉柄并切分為長0.5cm左右小段，接到誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中(Ms+NAA0.5-0.7mg/L)培養(yǎng)28天，分化出的芽高1cm左右，分化率達93.3％。培養(yǎng)條件為溫度22-26℃，光照時間12-14h/d，光照強度為2000-3000Lux。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特征在于所述誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為Ms+NAA0.5-0.7mg/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特征在于所述的芽增殖培養(yǎng)是把剛分化出的芽轉(zhuǎn)移到芽增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)12-15天，獲得均勻一致的苗高達5cm左右，芽個數(shù)增殖3-5倍；培養(yǎng)條件相同，從每個芽團上切下2-3根葉柄，15-20小段，進行繼續(xù)繁殖。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特征在于所述芽增殖培養(yǎng)基Ms+6-BA0.4-0.6mg/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特征在于所述生根培養(yǎng)是將余下的芽團按鱗球切分為單株接到生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，切分比例為1∶3-5，培養(yǎng)7-9天后開始生根，21天后根系發(fā)達，生根培養(yǎng)基為Ms+NAA0-0.05mg/L。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特征在于所述煉苗移栽系當苗在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)21天后，將瓶口打開，煉苗3-5天后，移栽到帶營養(yǎng)土容器中，移栽前7天，保持環(huán)境溫度在15-30℃，濕度50％以上。
10.根據(jù)權(quán)利要求10所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特征在于所述營養(yǎng)土成分為農(nóng)田土∶泥碳土∶砂子＝4∶3∶3。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種紫葉酢漿草組培快繁方法。本發(fā)明步驟依序為采集外植體、消毒、建立無菌苗；建立一套試管苗的快速繁殖循環(huán)體系；煉苗移栽。所述外植體取自紫葉酢漿草新抽出的葉片與葉柄，將葉柄切成0.5cm左右小段后接種在初代培養(yǎng)基上，把葉片切成小塊后接種到同樣培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)溫度為22－26℃，光照時間12－14小時/天，光照強度為2000－3000Lux的條件下，培養(yǎng)28－30天后就分化出無菌的再生植株；所述試管苗的快繁循環(huán)體系以葉柄為起始材料，誘導(dǎo)分化出小芽，再進行芽增殖培養(yǎng)，最后從芽團上切下部分芽的葉柄作為繁殖起始材料，余下的芽團切分成單株后進行生根培養(yǎng)。
文檔編號A01H4/00GK1586170SQ200410053518
公開日2005年3月2日 申請日期2004年8月6日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月6日
發(fā)明者宋學(xué)孟, 龐瑞華, 王凌健, 樓文阜, 董舉文, 何燕紅 申請人:上海光兆植物速生技術(shù)有限公司