專利名稱：一種微生物菌劑及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種微生物菌劑及其制備方法和應用，更具體地說，涉及一種由解脂雅洛氏酵母菌(Yaliowia lipolytica)、綠色木霉菌(Trichodermaviride)、高溫芽孢桿菌(Bacillus sp.)、生黑鏈霉菌(Steptomyces pigrifacienfs)、諾卡氏菌(Nocardia sp.)五種菌株和固體培養(yǎng)基組成的微生物菌劑及其制備方法和作為糞便處理劑的應用。
背景技術：
目前，應用于畜禽糞便無害化處理的微生物發(fā)酵菌劑已有多種專利和文獻報道，它們可分為三種類型一種是自然菌群發(fā)酵法，即堆積畜禽糞便，在好氧條件下，利用廢物本身的微生物繁殖進行發(fā)酵，這種方法的缺點是發(fā)酵時間長，發(fā)酵過程會給環(huán)境帶來一定的影響；第二種方法是將一些具有發(fā)酵功能的微生物應用于糞便的發(fā)酵，但由于沒有利用高溫發(fā)酵菌株和脫臭發(fā)酵菌株的功能，往往導致發(fā)酵不徹底或需較長時間，并且發(fā)酵產(chǎn)品吸潮后會返臭；第三種方法是利用環(huán)境友好微生物菌群發(fā)酵廢棄物，這種菌群具有發(fā)酵、除臭、殺病菌的多重功能，但由于菌群龐大，成本高，應用受到限制。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種微生物菌劑及其制備方法和應用，它能克服一種微生物菌劑，其特征在于由解脂雅洛氏酵母菌、綠色木霉菌、高溫芽孢桿菌、生黑鏈霉菌、諾卡氏菌五種菌株和固體培養(yǎng)基組成，該五種菌株在每克菌劑中的菌數(shù)范圍比為15～30∶20～40∶15～30∶15～30∶15～30。
上述微生物菌劑的制備方法，其特征在于，首先將解脂雅洛氏酵母菌、綠色木霉菌、高溫芽孢桿菌、生黑鏈霉菌、諾卡氏菌分別依次作一級斜面培養(yǎng)、二級液體振蕩培養(yǎng)、三級固體發(fā)酵培養(yǎng)，至每克固體培養(yǎng)基中的菌數(shù)分別達到0.5～1.2×108個、1.0～5.0×108個、1.0～2.5×108個、1.0～2.5×108個、1.0～2.5×108個；所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)在固體培養(yǎng)基上進行，使用前，調節(jié)培養(yǎng)基中的水份至40～50％，121～122℃，濕熱滅菌30～40分鐘，冷卻至室溫；最后，將各菌株純培養(yǎng)物在室溫下按單一菌株的菌數(shù)范圍比15～30∶20～40∶15～30∶15～30∶15～30進行攪拌混合。
上述微生物菌劑用作糞便處理劑。
本發(fā)明的優(yōu)點是所用的微生物能針對性地去除糞便中的臭味物質--脂肪酸和糞蛋白，同時兼顧了中溫和高溫階段的分解作用，故本菌劑能將除臭和發(fā)酵兩種功能有機地結合在一起，有效地利用了微生物的轉化和代謝發(fā)熱作用，實現(xiàn)了畜禽糞便水份和臭味的快速脫除，同時廢棄物可作為優(yōu)質的有機肥料使用，方法簡單、成本低，無環(huán)境污染。
具體實施例方式
本發(fā)明所用的解脂雅洛氏酵母菌、生黑鏈霉菌、諾卡氏菌等三種菌株己于2004年6月7日前在武漢大學中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，它們的保藏號分別為CCTCC NO M95017、CCTCC NO AA92021、CCTCC NOM95018；綠色木霉菌株和高溫芽孢桿菌株在市場上已公開銷售。
實施例1解脂雅洛氏酵母菌株的培養(yǎng)解脂雅洛氏酵母菌首先在馬鈴薯養(yǎng)基上，30℃，作一級斜面培養(yǎng)；48小時后，接種到搖瓶里，30℃，作二級液體振蕩培養(yǎng)；36小時后，以重量比為5％的接種量，接種到固體培養(yǎng)基上，30℃，作三級培養(yǎng)至菌數(shù)達到0.8×108個/克固體培養(yǎng)基。
綠色木霉菌株的培養(yǎng)綠色木霉菌首先在PDA培養(yǎng)基上，30℃，作一級斜面培養(yǎng)；72小時后，接種到搖瓶里，30℃，作二級液體振蕩培養(yǎng)；48小時后，以重量比為5％的接種量，接種到固體培養(yǎng)基上，30℃，作三級培養(yǎng)至菌數(shù)達到3.0×108個/克固體培養(yǎng)基。
高溫芽孢桿菌株的培養(yǎng)高溫芽孢桿菌首先在肉湯蛋白胨培養(yǎng)基上，30℃，作一級斜面培養(yǎng)；48小時后，接種到搖瓶里，30℃，作二級液體振蕩培養(yǎng)；24小時后，以重量比為5％的接種量，接種到固體培養(yǎng)基上，30℃，作三級培養(yǎng)至菌數(shù)達到1.5×108個/克固體培養(yǎng)基。
生黑鏈霉菌株的培養(yǎng)生黑鏈霉菌首先在高氏一號培養(yǎng)基上，30℃，作一級斜面培養(yǎng)；48小時后，接種到搖瓶里，30℃，作二級液體振蕩培養(yǎng)；36小時后，以重量比為5％的接種量，接種到固體培養(yǎng)基上，30℃，作三級培養(yǎng)至菌數(shù)達1.5×108個/克固體培養(yǎng)基；諾卡氏菌株的培養(yǎng)諾卡氏菌首先在GY培養(yǎng)基上，30℃，作一級斜面培養(yǎng)；48小時后，接種到搖瓶里，30℃，作二級液體振蕩培養(yǎng)；36小時后，以重量比為5％的接種量，接種到固體培養(yǎng)基上，30℃，作三級培養(yǎng)至菌數(shù)達1.5×108個/克固體培養(yǎng)基。
固體培養(yǎng)基的制備上述五種菌株的固體培養(yǎng)基的組成及重量百分比為米糠50％、麩皮20％、玉米粉15％、大豆粉12％、石灰粉2.9％、硫酸銨0.1％。使用前，調節(jié)培養(yǎng)基中的水份至45％，121℃，濕熱滅菌30分鐘，冷卻至室溫。
菌株純培養(yǎng)物的混合將各菌株純培養(yǎng)物以質量比2∶1∶1∶1∶1混合，就得到了本發(fā)明的微生物菌劑。
另將畜禽糞便置于發(fā)酵槽中，按重量比加入40％的秸桿粉混勻，調節(jié)水份至45％，獲得預處理物料。在室溫下，以重量比為5％的接種量向預處理物料中加入上述微生物菌劑，進行攪拌，并定時曝氣，10天內可以達到完全腐熟，含水量降至20％左右，腐熟的物料為灰色，略帶酒糟氣味。
實施例21噸鮮雞糞(含水量45～70％)按實施例1中的方法預處理以后，加入0.05噸的上述微生物菌劑，于室溫下發(fā)酵，3天后，溫度可達50℃，定時攪拌和通氣，勿使發(fā)酵溫度超過70℃，10天內發(fā)酵過程結束，得到灰色略帶酒糟氣味的發(fā)酵產(chǎn)品。與自然發(fā)酵組對照，結果表明，加入本發(fā)明的微生物菌劑，發(fā)酵周期由1個半月縮短至1個星期；產(chǎn)品含水量由40％降至20％左右；產(chǎn)品的外觀和氣味分別為灰色和略帶酒糟氣味，不同于自然發(fā)酵產(chǎn)品的黑色和霉腥味；產(chǎn)品含氮量為自然發(fā)酵的1.5倍，略低于未發(fā)酵物料，其中氨態(tài)氮有損失；磷和鉀含量兩者相當，并均與未發(fā)酵物料相當；產(chǎn)品的有機質含量較自然發(fā)酵制得的產(chǎn)品高，略低于未發(fā)酵物料。
權利要求
1.一種微生物菌劑，其特征在于由解脂雅洛氏酵母菌、綠色木霉菌、高溫芽孢桿菌、生黑鏈霉菌、諾卡氏菌五種菌株和固體培養(yǎng)基組成，該五種菌株在每克菌劑中的菌數(shù)范圍比為15～30∶20～40∶15～30∶15～30∶15～30。
2.如權利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于所述的固體培養(yǎng)基由米糠、麩皮、玉米粉、大豆粉、石灰粉和硫酸銨組成，它們的重量百分數(shù)范圍依次分別為45～60％、15～25％、10～20％、7～15％、2～5％、0.05～0.1％。
3.權利要求1所述的微生物菌劑的制備方法，其特征在于首先將解脂雅洛氏酵母菌、綠色木霉菌、高溫芽孢桿菌、生黑鏈霉菌、諾卡氏菌分別依次作一級斜面培養(yǎng)、二級液體振蕩培養(yǎng)、三級固體發(fā)酵培養(yǎng)，至每克固體培養(yǎng)基中的菌數(shù)分別達到0.5～1.2×108個、1.0～5.0×108個、1.0～2.5×108個、1.0～2.5×108個、1.0～2.5×108個；所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)在固體培養(yǎng)基上進行，使用前，調節(jié)培養(yǎng)基中的水份至40～50％，121～122℃，濕熱滅菌30～40分鐘，冷卻至室溫；最后，將各菌株純培養(yǎng)物在室溫下按單一菌株的菌數(shù)范圍比15～30∶20～40∶15～30∶15～30∶15～30進行攪拌混合。
4.權利要求1所述的微生物菌劑用作糞便處理劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種微生物菌劑及其制備方法，它可有效地解決規(guī)?；B(yǎng)殖場畜禽糞便對環(huán)境的污染，同時實現(xiàn)廢棄資源的綜合開發(fā)利用。所述的微生物菌劑由解脂雅洛氏酵母菌、綠色木霉菌、高溫芽孢桿菌、生黑鏈霉菌、諾卡氏菌五種菌株和固體培養(yǎng)基組成，它可以用作糞便處理劑。所述的制備方法包括上述菌株的三級純培養(yǎng)和培養(yǎng)物的按比例混合。本菌劑制備方法簡單，成本低，它將除臭和發(fā)酵功能有機地結合在一起，有效地利用了微生物的轉化和代謝發(fā)熱作用，實現(xiàn)了畜禽糞便水分和臭味的快速脫除，同時廢棄物可作為優(yōu)質的有機肥料使用，無環(huán)境污染。
文檔編號C05F3/00GK1594538SQ20041002445
公開日2005年3月16日 申請日期2004年7月8日 優(yōu)先權日2004年7月8日
發(fā)明者胡國斌, 叢日山, 劉怡 申請人:中國海洋大學