專(zhuān)利名稱(chēng)：一種用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種防治植物病害的復(fù)配農(nóng)藥，尤其是一種微生物和化學(xué)農(nóng)藥的復(fù)配農(nóng)藥，同時(shí)本發(fā)明還涉及該復(fù)配農(nóng)藥的制備方法，屬于農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
眾所周知，水稻、果樹(shù)和蔬菜上的病害繁多，危害嚴(yán)重。其中，有些病害的發(fā)生、發(fā)展嚴(yán)重影響了水稻、果樹(shù)和蔬菜的優(yōu)良品質(zhì)。據(jù)申請(qǐng)人所知，目前作物病害的防治主要依賴(lài)化學(xué)農(nóng)藥。雖然化學(xué)農(nóng)藥的大量使用在確保農(nóng)作物高產(chǎn)、控制病害流行方面起到了切實(shí)有效的作用，但同時(shí)也給人類(lèi)的生存帶來(lái)了日益嚴(yán)重的負(fù)面影響。
一方面，化學(xué)農(nóng)藥在防治病害的同時(shí)，不可避免地殺滅了這些病害的天敵，從而使得田間生物群落的自然控害作用嚴(yán)重受到抑制，病原菌對(duì)農(nóng)藥的抗藥性水平越來(lái)越高，農(nóng)藥的控害效果下降，最終導(dǎo)致產(chǎn)生用藥量和施藥次數(shù)不斷增加，污染了農(nóng)田生態(tài)環(huán)境的嚴(yán)重后果。另一方面，農(nóng)藥的大量使用嚴(yán)重影響了農(nóng)產(chǎn)品的天然品質(zhì)，尤其在我國(guó)加入WTO后，農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品中的殘留形成嚴(yán)重阻礙我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品出口的綠色壁壘。面對(duì)農(nóng)產(chǎn)品新的需求形勢(shì)和要求，有必要研究新的病害防治思路，建立以保障農(nóng)產(chǎn)品的天然優(yōu)良品質(zhì)為核心，開(kāi)發(fā)環(huán)境相容性好、低殘留、對(duì)人畜無(wú)毒害的綠色農(nóng)藥，為我國(guó)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展的提供技術(shù)支撐。
例如，水稻稻曲病(病原菌為子囊菌Ustilaginoidea virens)、梨黑斑病(病原菌為半知菌Alternaria kikuchiana Tanaka)、茄科蔬菜枯萎病(病原菌為半知菌Fusarium)和葉霉病(病原菌為半知菌Fulvia fulva)是病害，在世界各地普遍發(fā)生，是糧食、水果和蔬菜上的重要病害。其中，水稻稻曲病發(fā)病率可高達(dá)44.1％，產(chǎn)量損失達(dá)26.9％，已成為水稻生產(chǎn)的重要病害之一。尤其是稻曲病菌可產(chǎn)生對(duì)人畜有害的毒素，混雜于病稻谷中的稻曲病菌，對(duì)人們的健康構(gòu)成直接的危害，成為水稻無(wú)公害生產(chǎn)的突出問(wèn)題，嚴(yán)重影響了稻米的優(yōu)質(zhì)安全。
梨黑斑病是梨的生育期內(nèi)的主要病害，遍布全國(guó)各梨產(chǎn)區(qū)，該病原菌在梨掛果期均可為害，影響產(chǎn)量。其次，梨的掛果期長(zhǎng)，在生育期內(nèi)該病害的防治必須頻繁用藥，且用藥量大，因此農(nóng)藥殘留嚴(yán)重地影響梨子的品質(zhì)，對(duì)人的健康形成了潛在的危害。
枯萎病和番茄葉霉病是茄科蔬菜的主要病害，目前蔬菜上農(nóng)藥的使用頻率和使用量是所有作物中最多的。枯萎病菌致使植株萎蔫，最后死亡，是毀滅性病害；葉霉病在我國(guó)各地均有發(fā)生，尤其以保護(hù)地番茄受害最重，嚴(yán)重時(shí)減產(chǎn)20％-30％。目前茄科蔬菜的枯萎病和番茄葉霉病的防治主要采用土壤處理、煙劑等防治，由于高頻率的使用農(nóng)藥，污染了農(nóng)田環(huán)境，同時(shí)農(nóng)藥的殘留影響了蔬菜的品質(zhì)。
隨著經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和人民生活水平的提高，人們對(duì)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)量的要求越來(lái)越高。在盡量減少由病蟲(chóng)害導(dǎo)致的產(chǎn)量損失的同時(shí)，減少化學(xué)農(nóng)藥的用量和殘留，保持農(nóng)產(chǎn)品的天然品質(zhì)，已成為人們的共識(shí)。因此，研制開(kāi)發(fā)新的防治藥劑，尤其是生物農(nóng)藥極為重要和緊迫。
令人可喜的是，人類(lèi)發(fā)現(xiàn)有一種枯草芽孢桿菌微生物的細(xì)菌菌群中存有對(duì)多種真菌病害的病原菌具有拮抗作用的菌株。目前國(guó)內(nèi)外均已開(kāi)展用具有拮抗作用的枯草芽孢桿菌來(lái)防治作物病害的研究。國(guó)外報(bào)導(dǎo)主要對(duì)棉花、番茄的枯萎病(Mahaffee，W.Rosales A.M.Effects of seedfactors on Spermoshpere and rhizoshpere colonization of cotton byBacillus subtilis GB03，Phtopathology83，1120-1125)，國(guó)內(nèi)研究者發(fā)表了枯草芽孢桿菌抗菌物質(zhì)及對(duì)其抗菌蛋白分離的研究報(bào)告(孔建等，1992“枯草芽孢桿菌Bs-903菌株抗菌物質(zhì)研究”《微生物學(xué)報(bào)》32(6))。但據(jù)申請(qǐng)人了解，至今未見(jiàn)有將枯草芽孢桿菌和某種農(nóng)藥復(fù)配后對(duì)包括上述四種病害在內(nèi)的多種作物病害均具有良好防治效果的微生物復(fù)配農(nóng)藥。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于面對(duì)目前生產(chǎn)上大量使用化學(xué)農(nóng)藥防治農(nóng)作物病害、嚴(yán)重污染農(nóng)田生態(tài)環(huán)境、導(dǎo)致農(nóng)藥殘留超標(biāo)、影響農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)的狀況，通過(guò)研究枯草芽孢桿菌和化學(xué)農(nóng)藥的復(fù)配，引進(jìn)微生物菌劑，提出一種對(duì)各種常見(jiàn)作物病害均具有良好防治效果的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，同時(shí)給出該復(fù)配農(nóng)藥的制備方法，從而實(shí)現(xiàn)操縱管理生態(tài)環(huán)境中微生物群的合理分布，惡化病原菌的生存環(huán)境，結(jié)合栽培管理和化學(xué)防治措施形成穩(wěn)定、平衡、生物多樣化的農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)，有效、較持久地控制作物病害的流行，同時(shí)有效降低化學(xué)農(nóng)藥的使用量，改善農(nóng)田生態(tài)環(huán)境，減少農(nóng)藥殘留，以利于保持農(nóng)產(chǎn)品的優(yōu)良品質(zhì)，保障農(nóng)產(chǎn)品安全。
申請(qǐng)人經(jīng)過(guò)不斷的探索摸索和反復(fù)對(duì)比實(shí)驗(yàn)，形成了本發(fā)明復(fù)配農(nóng)藥的技術(shù)方案，其要點(diǎn)是將枯草芽孢桿菌Bs-916菌株(以下簡(jiǎn)稱(chēng)Bs-916菌株)移植于細(xì)菌培養(yǎng)基上活化；配制含咪鮮安濃度遞增的細(xì)菌培養(yǎng)基，將活化后的Bs-916菌株移入含低濃度咪鮮安的細(xì)菌培養(yǎng)基中，待生長(zhǎng)良好后，再移入含咪鮮安濃度遞增的細(xì)菌培養(yǎng)基中，依次類(lèi)推，直到獲得具有抗藥性的Bs-916抗性菌株；將抗咪鮮安的Bs-916菌株移入細(xì)菌培養(yǎng)液培養(yǎng)獲得培養(yǎng)液菌劑；將獲得的菌劑與咪鮮安配制，即可獲得本發(fā)明由抗咪鮮安的Bs-916菌劑與咪鮮安配制而成的增效型微生物復(fù)配劑。
需要說(shuō)明的是，上述枯草芽孢桿菌Bs-916菌種于二○○二年九月三十日在北京的中國(guó)典型微生物保藏中心(CGMCC)保藏，保藏編號(hào)為CGMCCNo.0808，拉丁學(xué)名為bacillus subtilis Bs-916(本文簡(jiǎn)稱(chēng)Bs-916)。其生物學(xué)性狀記載為菌落形態(tài)單細(xì)胞形成菌落圓形，四周光滑，YPGA(酵母膏5.0g，胰蛋白胨5.0g；葡萄糖5.0g，瓊脂17.0g；水1000ml)培養(yǎng)基平板上生長(zhǎng)24h的菌落3-5mm，米色，表面有皺褶。鑒別性狀格蘭氏反應(yīng)陰性，嚴(yán)格好氣，2％NaCl不能生長(zhǎng)，乳果糖、L-阿拉伯糖、L-乳酸、松三糖和D-蘋(píng)果酸利用反應(yīng)均為陰性，甘油、蔗糖、麥芽糖和纖維二糖利用反應(yīng)均為陽(yáng)性。
較具體些說(shuō)，本發(fā)明的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥采用以下步驟制備1、活化將枯草芽孢桿菌Bs-916菌株移植于細(xì)菌培養(yǎng)基上活化。
2、抗藥性誘導(dǎo)將細(xì)菌培養(yǎng)基配制成帶咪鮮安平板，其中咪鮮安的濃度遞增，例如為5ug/ml，10ug/ml，20ug/ml.......直至1000ug/ml。將活化后的Bs-916菌株移入含低濃度咪鮮安，例如5ug/ml的平板中，待生長(zhǎng)良好后，再移入濃度遞增的10ug/ml的平板中，依次類(lèi)推，直到獲得能在1000ug/ml上生長(zhǎng)的Bs-916抗性菌株。
3、獲取培養(yǎng)液將抗咪鮮安的Bs-916菌株活化后，移入細(xì)菌培養(yǎng)液，15-38℃內(nèi)振蕩培養(yǎng)22-55小時(shí)獲得培養(yǎng)液菌劑，菌含量為2-5×1010cfu/ml。
4、復(fù)配成藥將制獲得的菌劑與按比例配制，獲得本發(fā)明的增效型微生物復(fù)配劑。
容易理解，以上咪鮮安為廣義概念，即包括各種咪鮮安鹽類(lèi)(例如常用的咪鮮安錳鹽等)。
本發(fā)明微生物復(fù)配農(nóng)藥的有益效果如下1、依據(jù)微生態(tài)學(xué)原理，通過(guò)引進(jìn)微生物菌劑，操縱管理生態(tài)環(huán)境中微生物群落的合理分布，惡化病原菌的生存環(huán)境，結(jié)合栽培管理、農(nóng)業(yè)和化學(xué)防治措施，形成一個(gè)穩(wěn)定的、平衡的、生物多樣化的農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)，從而有效地、較持久地控制多種作物病害的流行。
2、微生物農(nóng)藥具有化學(xué)藥劑所不具備的優(yōu)點(diǎn)，其控病作用機(jī)制主要為①優(yōu)勢(shì)種群的競(jìng)爭(zhēng)作用——枯草芽孢桿菌Bs-916具有在植株上定殖能力強(qiáng)、繁殖快的特點(diǎn)，能與病原菌有效競(jìng)爭(zhēng)侵染位點(diǎn)，減少病害發(fā)病機(jī)率(參見(jiàn)表1)。②拮抗素抗生作用——枯草芽孢桿菌Bs-916能分泌產(chǎn)生拮抗素，其能有效地控制病害的生長(zhǎng)、侵染和蔓延(參見(jiàn)表2)。③拮抗菌的誘導(dǎo)抗性作用——枯草芽孢桿菌Bs-916在葉面噴施后，可以誘導(dǎo)植株內(nèi)大量產(chǎn)生與抗病性有關(guān)的酶類(lèi)，從而增強(qiáng)了植株抵御病原菌侵入、蔓延的能力。
3、復(fù)配劑的增效作用，枯草芽孢桿菌Bs-916和高效低毒的化學(xué)農(nóng)藥咪鮮安復(fù)配后，組分間具有優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)的作用，既能發(fā)揮咪鮮安的高效、快速的抑菌作用，又能發(fā)揮拮抗菌Bs-916在田間定殖、大量繁殖后微生物群落合理分布的調(diào)整功能，從而達(dá)到可持續(xù)控制病害的目的，同時(shí)降低了化學(xué)農(nóng)藥的使用量。
4、將枯草芽孢桿菌發(fā)酵液與咪鮮安以任意比例進(jìn)行復(fù)配，只要選取恰當(dāng)?shù)膹?fù)配比例，就可以使本發(fā)明農(nóng)藥的應(yīng)用達(dá)到既能發(fā)揮最佳藥效作用，又能減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量和使用次數(shù)，盡可能保持農(nóng)產(chǎn)品天然品質(zhì)的目的。
理論和實(shí)踐可以證明，在田間使用本發(fā)明的復(fù)配農(nóng)藥噴霧、灌根等，幾乎對(duì)多種常見(jiàn)作物病害都具有良好的防治效果，對(duì)減少農(nóng)藥殘留、保護(hù)農(nóng)田生態(tài)環(huán)境具有積極意義，有利于保持農(nóng)產(chǎn)品的優(yōu)良品質(zhì)，保障農(nóng)產(chǎn)品安全。
具體實(shí)施例方式
實(shí)例一將枯草芽孢桿菌(Bs-916)和咪鮮安復(fù)配后，噴霧防治水稻稻曲病按照以下步驟復(fù)配本發(fā)明的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥將枯草芽孢桿菌Bs-916菌株移植于YPGA培養(yǎng)基上活化；將培養(yǎng)基配制成帶咪鮮安平板，其中咪鮮安的濃度為5ug/ml，10ug/ml，20ug/ml.......直至1000ug/ml。將活化后的Bs-916菌株移入5ug/ml的平板中，待生長(zhǎng)良好后，再移入10ug/ml的平板中，依次類(lèi)推，直到獲得能在1000ug/ml上生長(zhǎng)的Bs-916抗性菌株；將抗咪鮮安的Bs-916菌株活化后，移入YPG培養(yǎng)液，28℃振蕩培養(yǎng)48小時(shí)獲得培養(yǎng)液菌劑，菌含量約為2.5×1010cfu/ml；將制獲得的菌劑與咪鮮安按2∶3(40％∶60％)的重量比例配制成本發(fā)明的增效型微生物復(fù)配劑。
將本實(shí)施例的復(fù)配農(nóng)藥噴霧防治水稻稻曲病，發(fā)現(xiàn)其對(duì)水稻稻曲病菌室內(nèi)具有優(yōu)越的抑制效果；田間試驗(yàn)結(jié)果表明(參見(jiàn)表1，注咪鮮安錳鹽即咪鮮安)，該復(fù)配劑在安徽的試驗(yàn)結(jié)果為稻曲病的田間防治效果為73.14％。在江西的試驗(yàn)結(jié)果表明，每畝使用60g時(shí)，防治效果在94.84％。其防治效果均高于組分藥劑，可有效降低化學(xué)藥劑的使用量，利于保持水稻的優(yōu)良品質(zhì)，可降低農(nóng)藥的殘留量。
實(shí)例二將枯草芽孢桿菌(Bs-916)和咪鮮安復(fù)配后，潑澆和灌根防治番茄枯萎病按與實(shí)施例一類(lèi)似的步驟復(fù)配本發(fā)明的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其中移入YPG培養(yǎng)液后，18℃內(nèi)振蕩培養(yǎng)50小時(shí)獲得培養(yǎng)液菌劑，菌含量略大于2×1010cfu/ml；將制獲得的菌劑與咪鮮安按1∶1(50％∶50％)、1∶3(25％∶75％)的重量比例配制成本發(fā)明的增效型微生物復(fù)配劑(產(chǎn)品名久安)。
將本實(shí)施例的復(fù)配農(nóng)藥潑澆和灌根防治番茄枯萎病，發(fā)現(xiàn)其對(duì)茄科枯萎病菌具有優(yōu)良的抑制效果。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，其防治效果在90％以上，具有優(yōu)良的防治效果(表2)。
實(shí)例三將枯草芽孢桿菌(Bs-916)和咪鮮安復(fù)配后，噴霧防治番茄葉霉病按與實(shí)施例一類(lèi)似的步驟復(fù)配本發(fā)明的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其中移入YPG培養(yǎng)液后，32℃內(nèi)振蕩培養(yǎng)45小時(shí)獲得培養(yǎng)液菌劑，菌含量約為4×1010cfu/ml；將制獲得的菌劑與咪鮮安按3∶1(75％∶27％)的重量比例配制成本發(fā)明的增效型微生物復(fù)配劑。
將本實(shí)施例的復(fù)配農(nóng)藥噴霧防治番茄葉霉病，田間試驗(yàn)結(jié)果表明，其防治效果在80％以上，具有優(yōu)良的控制效果。高于同類(lèi)化學(xué)藥劑(表3)。
實(shí)例四將枯草芽孢桿菌和咪鮮安復(fù)配后，對(duì)梨黑斑病菌具有優(yōu)良的抑制作用。
按與實(shí)施例一類(lèi)似的步驟復(fù)配本發(fā)明的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其中移入YPG培養(yǎng)液后，28℃內(nèi)振蕩培養(yǎng)48小時(shí)獲得培養(yǎng)液菌劑，菌含量約為4×1010cfu/ml；將制獲得的菌劑與咪鮮安按3∶1(75％∶27％)、2∶1(66％∶33％)、1∶1(50％∶50％)、1∶2(33％∶66％)1∶3(25％∶75％)的重量比例配制成本發(fā)明的增效型微生物復(fù)配劑。
將本實(shí)施例的復(fù)配農(nóng)藥用于防治梨黑斑病菌后，室內(nèi)測(cè)定了其對(duì)梨黑斑病菌的抑制作用(表4)，結(jié)果表明，本復(fù)配劑對(duì)梨黑斑病菌的抑菌能力明顯提高。其抑菌作用均高于組分藥劑。
細(xì)菌培養(yǎng)基除了YPGA外，也可以用LB、NA、KMB等，細(xì)菌培養(yǎng)液除了YPG，也可以用液體LB、NA、KMB等。培養(yǎng)液菌劑的菌含量大于2×1010cfu/ml，通常為2-5×1010cfu/ml。理論上，上述配制可用的重量百分比范圍是菌劑含量1％-99％，咪鮮安1％-99％；實(shí)際可行的重量百分比范圍是菌劑含量10％-90％，咪鮮安10％-90％；而通常較好的重量百分比范圍是菌劑含量20％-80％，咪鮮安20％-80％。
綜上所述，枯草芽孢桿菌生防Bs-916菌株和咪鮮安復(fù)配后，對(duì)多種植物病原菌均有優(yōu)良的抑制效果，對(duì)病害也有較好的防治效果。通過(guò)相關(guān)的增效分析，結(jié)果表明，增效作用顯著，生防菌Bs-916和咪鮮安復(fù)配后可有效的控制多種農(nóng)作物病害，同時(shí)減少了化學(xué)農(nóng)藥的使用量，降低了化學(xué)農(nóng)藥的選擇壓和抗藥性發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，可減少農(nóng)藥殘留，有利于保障農(nóng)產(chǎn)品優(yōu)良品質(zhì)，在防治效果優(yōu)于生產(chǎn)上同類(lèi)藥劑。
表1 2.5×1010活芽孢/ml枯草芽孢桿菌·鮮安錳鹽WP防治水稻稻曲病田間試驗(yàn)結(jié)果
表2拮抗細(xì)菌、微生物農(nóng)藥復(fù)配劑對(duì)茄科蔬菜枯萎病的防治效果處理 處理后50天 處理后70天平均病指 防效(％)平均病指 防效(％)2×1010活芽孢/ml 0 100.00 0 100.00枯草芽孢桿菌·咪鮮胺錳鹽WP 1∶12×1010活芽孢/ml 0 100.00 1 95.45枯草芽孢桿菌·25％咪鮮胺錳鹽WP 1∶3施保功(低)0 100.00 0 100.00空白對(duì)照 17 22表3拮抗細(xì)菌、微生物農(nóng)藥復(fù)配劑對(duì)茄科蔬菜葉霉病的防治效果試驗(yàn)藥劑 使用藥前14天防治效果 28天防治效果濃度病情病情 病情增長(zhǎng) 防治效 病情病情增長(zhǎng) 防治(倍)指數(shù)指數(shù) 率(％)果(％) 指數(shù)率(％)效果(％)4×1010活芽孢/ml枯草 10003.404.52 32.94 82.59a 4.8241.76 87.07a芽孢桿菌·咪鮮胺錳鹽 500 4.155.02 20.96 84.16a 5.4030.12 88.13aWP甲霜靈錳鋅 10003.528.87 152.0067.00b 9.78177.8474.67b多菌靈 700 3.349.87 195.5161.30b 10.23 206.2972.08b對(duì)照 清水3.5126.8 663.53 38.5996.87
表4對(duì)梨黑斑病菌的抑制效果
(*比例為2.5×1010活芽孢/ml枯草芽孢桿菌25％咪鮮胺錳鹽)
權(quán)利要求
1.一種用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其特征在于由抗咪鮮安的枯草芽孢桿菌Bs-916(拉丁學(xué)名bacillus subtilis Bs-916)菌劑與咪鮮安或咪鮮安鹽配制而成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其特征在于所述抗咪鮮安Bs-916菌劑的菌含量大于2×1010cfu/ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其特征在于所述抗咪鮮安Bs-916菌劑與咪鮮安配制的重量百分比為菌劑10％-90％，咪鮮安10％-90％。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其特征在于所述抗咪鮮安Bs-916菌劑與咪鮮安配制的重量百分比為菌劑20％-80％，咪鮮安20％-80％。
5.一種用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥制備方法，其步驟為1)、活化——將枯草芽孢桿菌Bs-916菌株移植于細(xì)菌培養(yǎng)基上活化；2)、抗藥性誘導(dǎo)——配制含咪鮮安濃度遞增的細(xì)菌培養(yǎng)基，將活化后的Bs-916菌株移入含低濃度咪鮮安的細(xì)菌培養(yǎng)基中，待生長(zhǎng)良好后，再移入含咪鮮安濃度遞增的細(xì)菌培養(yǎng)基中，依次類(lèi)推，直到獲得具有抗藥性的Bs-916抗性菌株；3)、獲取培養(yǎng)液——將抗咪鮮安的Bs-916菌株移入細(xì)菌培養(yǎng)液培養(yǎng)獲得培養(yǎng)液菌劑；4)、復(fù)配劑的制備——將獲得的菌劑與咪鮮安或咪鮮安鹽配制成增效型微生物復(fù)配劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥制備方法，其特征在于所述步驟1)中的細(xì)菌培養(yǎng)基為YPGA、LB、NA、KMB中的一種，步驟3)中的細(xì)菌培養(yǎng)液與步驟1)對(duì)應(yīng)。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥制備方法，其特征在于所述步驟2)將細(xì)菌培養(yǎng)基配制成帶咪鮮安不同濃度平板，其中咪鮮安的濃度為5ug/ml，10ug/ml，20ug/ml.......遞增直至1000ug/ml；將活化后的Bs-916菌株移入5ug/ml的平板中，待生長(zhǎng)良好后，再移入10ug/ml的平板中，依次類(lèi)推，直到獲得能在1000ug/ml上生長(zhǎng)的Bs-916抗性菌株。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥制備方法，其特征在于所述步驟3)中培養(yǎng)溫度為15-38℃，振蕩培養(yǎng)22-55小時(shí)獲得培養(yǎng)液菌劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥制備方法，其特征在于所述步驟3)中抗咪鮮安Bs-916菌劑的菌含量為2-5×1010cfu/ml。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種防治植物病害的微生物和化學(xué)農(nóng)藥的復(fù)配農(nóng)藥，同時(shí)還涉及該復(fù)配農(nóng)藥的制備方法，屬于農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域。其技術(shù)方案為將Bs－916菌株移植于培養(yǎng)基上活化；配制含咪鮮安濃度遞增的培養(yǎng)基，將活化后的Bs－916菌株移入含低濃度咪鮮安的培養(yǎng)基中，再逐漸移入含咪鮮安濃度遞增的培養(yǎng)基中，直到獲得Bs－916抗性菌株；將抗咪鮮安的Bs－916菌株移入YPG培養(yǎng)液培養(yǎng)獲得培養(yǎng)液菌劑；將獲得的菌劑與咪鮮安配制成增效型微生物復(fù)配劑。實(shí)踐證明，使用本發(fā)明的復(fù)配農(nóng)藥噴霧、灌根等，幾乎對(duì)各種常見(jiàn)作物病害都具有良好的防治效果，對(duì)減少農(nóng)藥殘留、保護(hù)農(nóng)田生態(tài)環(huán)境具有積極意義，有利于保持農(nóng)產(chǎn)品的優(yōu)良品質(zhì)，保障農(nóng)產(chǎn)品安全。
文檔編號(hào)A01N63/04GK1559228SQ20041001425
公開(kāi)日2005年1月5日 申請(qǐng)日期2004年3月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月9日
發(fā)明者陳志誼, 劉永鋒, 劉郵洲 申請(qǐng)人:江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院